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時(shí)間分辨熒光免疫層析原理

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    時(shí)間分辨熒光免疫層析原理

    當(dāng)將含有待測(cè)抗原(抗體)的樣品滴在加樣區(qū),待測(cè)樣品中的抗原(抗體)與結(jié)合墊中的熒光納米微球標(biāo)記的抗體(抗原)結(jié)合并通過(guò)毛細(xì)作用向前層析,當(dāng)達(dá)到檢測(cè)區(qū)后,與檢測(cè)線(xiàn)上固定的抗體(抗原)結(jié)合,形成微粒-抗體-抗原-抗體夾心復(fù)合物并被固定在檢測(cè)線(xiàn)上,而多余的熒光微球標(biāo)記物繼續(xù)向前層析,與固定在質(zhì)控線(xiàn)二抗結(jié)合。反應(yīng)結(jié)束后,用紫外光源(340nm)對(duì)檢測(cè)區(qū)掃描檢測(cè),檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)上熒光納米微球發(fā)出高強(qiáng)度的熒光(615nm),且衰變時(shí)間也較長(zhǎng)。利用延緩測(cè)量時(shí)間,待樣品基質(zhì)中自然發(fā)生的短壽命熒光(1-10ns)全部衰變后,再測(cè)量稀土元素的特異性熒光,這樣就可以*排除特異本底熒光的干擾。通過(guò)檢測(cè)線(xiàn)和質(zhì)控線(xiàn)熒光強(qiáng)度的強(qiáng)弱及其比值,即可分析出樣品中待測(cè)物的濃度。

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